p63 在口腔扁平苔藓中的表达

doi:10.3877/cma.j.issn.1674-1366.2008.06.004

目的

探讨p53 家族新成员p63 在口腔扁平苔藓（OLP）中的表达，其与OLP 发生、发展的关系以及是否可作为一种标志物预测OLP 的转归。

方法

采用免疫组织化学方法检测30 例OLP 中p63 蛋白的表达，同时采用RT-PCR 方法分析p63 编码的两大类转录产物TAp63 和ΔNp63 的mRNA 水平，并且与口腔鳞状细胞癌（OSCC）及正常口腔黏膜（NOM）进行比较。

结果

p63 蛋白在NOM、OLP 和OSCC 组中均有表达，与NOM 比较，其累积光密度（IOD）值在OLP 中下调，在OSCC中明显上调。在糜烂萎缩型OLP 中，p63 蛋白表达高于非糜烂型（P＜0.001）。 RT-PCR 检测结果显示，TAp63 的mRNA 水平在OLP 中表现为中等，略低于NOM，明显高于OSCC；ΔNp63 的mRNA 水平在NOM 和OLP 中极低，其转录扩增带大多数检测不到，但在OSCC 组都能检测到，而且呈高水平表达。 TAp63 的mRNA 水平在糜烂萎缩型OLP 中低于非糜烂型（P=0.018），ΔNp63 则高于非糜烂型（P=0.049）。

结论

p63 与OLP 的发病机制有关，其中TAp63 和ΔNp63 分别起不同的作用。 p63 表达的高低可能可以作为预测OLP 是否有高风险癌变的检测指标。

关键词: 口腔扁平苔藓, 口腔鳞状细胞癌, p63

Objective

To investigate the expression of p63 in oral lichen planus（OLP） and to evaluate the role of p63 in the development of OLP and prediction of cancer change as a molecular marker.

Methods

Tissue specimens of 30 OLP were examined by immunohistochemistry and reverse transcriptase-polymerase chain reaction （RT-PCR） for the expression of p63. Results were compared with normal oral mucosa（NOM） and oral squamous cell carcinoma（OSCC）.

Results

p63 expression was detect in all specimens. Compared with NOM， the integrated option density（IOD） value was down regulated in OLP， while up regulated in OSCC. Atrophic-erosive OLP showed higher p63 expression than reticular OLP. TAp63 mRNA was moderately expressed in OLP， being lower than in NOM and significantly higher than in OSCC. mRNA transcripts for ΔNp63 almost could not be detected in NOM and OLP tissues. But in OSCC， ΔNp63 mRNA was recognized in all tissues and expressed at a high level.

Conclusions

p63 might be associated with the pathogenesis of OLP. TAp63 and ΔNp63 have different function in OLP tissues. p63 might be an early marker to predict the carcinomatous change risk of OLP.

Key words: Oral lichen planus, Oral squamous cell carcinoma, p63

表1 TAp63、ΔNp63 及β-actin 引物设计

引物	上游（5′-3′）	下游（5′-3′）	相对分子质量
TAp63	GTCCCAGAGCACACAGACAA	GAGGAGCCGTTCTGAATCTG	267 000
ΔNp63	GAAAACAATGCCCAGACTCAA	TGCGCGTGGTCTGTGTTA	125 000
β-actin	ACCATGGATGATGATATCGC	TTGCTGATCCACATCTGCTG	400 000

表1 TAp63、ΔNp63 及β-actin 引物设计

引物	上游（5′-3′）	下游（5′-3′）	相对分子质量
TAp63	GTCCCAGAGCACACAGACAA	GAGGAGCCGTTCTGAATCTG	267 000
ΔNp63	GAAAACAATGCCCAGACTCAA	TGCGCGTGGTCTGTGTTA	125 000
β-actin	ACCATGGATGATGATATCGC	TTGCTGATCCACATCTGCTG	400 000

图1 NOM 组中p63 的阳性表达（Envision 二步法染色，×200）

图2 OLP 组中p63 的阳性表达（Envision 二步法染色，×200）

图3 OSCC 组中p63 的阳性表达（Envision 二步法染色，×200）

图4 OSCC 组中p63 在癌巢中的阳性表达（Envision 二步法染色，×200）

图5 β-actin 在各组中电泳结果，相对分子质量为400 000 M：DNA marker，600 000；1：NOM 组；2：OLP组；3：OSCC 组

图6 TAp63 在各组中电泳结果，相对分子质量为267 000 M：DNA marker，600 000；1：NOM 组；2：OLP组；3：OSCC 组

图7 ΔNp63 在各组中电泳结果，相对分子质量为125 000 M：DNA marker，600 000；1：NOM 组；2：OLP组；3：OSCC 组

表2 TAp63 和ΔNp63 在NOM/OLP/OSCC 组中的阳性表达

	正常组（n=10）	OLP组		OSCC组（n=30）
	正常组（n=10）	糜烂萎缩型（n=15）	非糜烂型（n=15）	OSCC组（n=30）
TAp63	9（90.00%）	12（80.00%）	15（100.00%）	10（33.33%）
ΔNp63	3（30.00%）	6（40.00%）	1（6.67%）	30（100.00%）

表2 TAp63 和ΔNp63 在NOM/OLP/OSCC 组中的阳性表达

	正常组（n=10）	OLP组		OSCC组（n=30）
	正常组（n=10）	糜烂萎缩型（n=15）	非糜烂型（n=15）	OSCC组（n=30）
TAp63	9（90.00%）	12（80.00%）	15（100.00%）	10（33.33%）
ΔNp63	3（30.00%）	6（40.00%）	1（6.67%）	30（100.00%）

表3 TAp63 和ΔNp63 在NOM 组/OLP 组/OSCC 组的灰度比值（±s）

	正常组（n=10）	OLP组（n=30）	OSCC组（n=30）	方差齐性	统计值	P
TAp63/β-actin	0.516±0.144	0.442±0.130	0.237±0.084	齐	F=24.661	＜0.001
ΔNp63/β-actin	0.219±0.086	0.195±0.095	0.792±0.194	不齐	χ ²=35.831	＜0.001

表3 TAp63 和ΔNp63 在NOM 组/OLP 组/OSCC 组的灰度比值（±s）

	正常组（n=10）	OLP组（n=30）	OSCC组（n=30）	方差齐性	统计值	P
TAp63/β-actin	0.516±0.144	0.442±0.130	0.237±0.084	齐	F=24.661	＜0.001
ΔNp63/β-actin	0.219±0.086	0.195±0.095	0.792±0.194	不齐	χ ²=35.831	＜0.001

表4 TAp63 和ΔNp63 在糜烂萎缩型OLP 和非糜烂型OLP 的灰度比值（±s）

	OLP组		t值	P
	糜烂萎缩型（n=15）	非糜烂型（n=15）	t值	P
TAp63/β-actin	0.357±0.118	0.469±0.078	-2.61	0.018
ΔNp63/β-actin	0.257±0.142	0.128±0.035	2.23	0.049

表4 TAp63 和ΔNp63 在糜烂萎缩型OLP 和非糜烂型OLP 的灰度比值（±s）

	OLP组		t值	P
	糜烂萎缩型（n=15）	非糜烂型（n=15）	t值	P
TAp63/β-actin	0.357±0.118	0.469±0.078	-2.61	0.018
ΔNp63/β-actin	0.257±0.142	0.128±0.035	2.23	0.049

1	Pindborg JJ， Reichart PA， Smith CJ， et al. Histological typing of cancer and precancer of the oral mucosa. World Health Organizationinternational histological classification of tumours， 2nd ed， Berlin：SpringerVerlag， 1997：1-83.
2	Cawson RA， Odell WE， Porter S. Diseases of the oral mucosa： noninfective stomatitis. Cawson's essential of oral pathology and oral medicine， 7th ed. London： Churchill Livingstone， 2002：198-202.
3	Kumamoto H， Ohki K， Ooya K. Expression of p63 and p73 in ameloblastomas. J Oral Pathol Med， 2005，34（4）：220-226.
4	Yang A， Kaghad M， Wang Y， et al. p63， a p53 homolog at 3q27-29， encodes multiple products with transactivating， death-inducing， and dominant-negative activities. Mol Cell， 1998，2（3）：305-316.
5	Liefer KM， Koster MI， Wang XJ， et al. Down-regulation of p63 is required for epidermal UV-B-induced apoptosis. Cancer Res， 2000，60（15）：4016-4020.
6	Ebrahimi M， Wahlin YB， Coates PJ， et al. Decreased expression of p63 in oral lichen planus and graft-vs.-host disease associated with oral inflammation. J Oral Pathol Med， 2006，35（1）：46-50.
7	Trink B， Osada M， Ratovitski E， et al. p63 transcriptional regulation of epithelial integrity and cancer. Cell Cycle， 2007，6（3）：240-245.
8	Oliveira LR， Ribeiro-Silva A， Zucoloto S. Prognostic significance of p53 and p63 immunolocalisation in primary and matched lymph node metastasis in oral squamous cell carcinoma. Acta Histochem， 2007，109（5）：388-396.
9	Sniezek JC， Matheny KE， Westfall MD， et al. Dominant negative p63 isoform expression in head and neck squamous cell carcinoma.Laryngoscope， 2004，114（12）：2063-2072.
10	Abbate G， Foscolo AM， Gallotti M， et al. Neoplastic transformation of oral lichen： case report and review of the literature. Acta Otorhinolaryngol Ita， 2006，26（1）：47-52.
11	Rasool S， Ali A， Bashir F. Oral lichen planus. J Coll Physicians Surg Pak， 2007，17（12）：764-765.
12	Tao X， Huang Y， Li R， et al. Assessment of local angiogenesis and vascular endothelial growth factor in the patients with atrophic-erosive and reticular oral lichen planus. Oral Surg Oral Med Oral Pathol Oral Radiol Endod， 2007，103（5）：661-669.
13	Hildesheim J， Belova GI， Tyner SD， et al. Gadd45a regulates matrix metalloproteinases by suppressing DeltaNp63 alpha and beta-catenin via p38 MAP kinase and APC complex activation. Oncogene， 2004，23（10）：1829-1837.

[1]	肖倩, 张丹丹, 张婷, 贺婵娟, 张伟芳, 吴登旬, 刘英. 树突状细胞在口腔扁平苔藓发病机制中的作用[J/OL]. 中华口腔医学研究杂志(电子版), 2022, 16(04): 229-233.
[2]	杨引申, 刘洋, 许晓珩, 姜啸, 孟文霞. 口腔扁平苔藓与系统性疾病关系的研究进展[J/OL]. 中华口腔医学研究杂志(电子版), 2022, 16(04): 224-228.
[3]	邓昊, 苏葵, 贾丽华, 吕倩书, 欧阳樱紫. Er：YAG激光联合他克莫司软膏治疗口腔扁平苔藓的临床研究[J/OL]. 中华口腔医学研究杂志(电子版), 2022, 16(04): 219-223.
[4]	左雯鑫, 袁理, 杨天慧, 汤剑明, 周芷伊, 何飞. 长链非编码RNA基因芯片技术筛选口腔扁平苔藓唾液外泌体差异表达基因[J/OL]. 中华口腔医学研究杂志(电子版), 2022, 16(04): 208-218.
[5]	陈晰娟, 夏娟. 口腔扁平苔藓的治疗进展[J/OL]. 中华口腔医学研究杂志(电子版), 2022, 16(04): 203-207.
[6]	吕宗凯, 郑杨灿, 杜胜男, 杨映阳. Nd：YAG激光治疗口腔扁平苔藓疗效的Meta分析[J/OL]. 中华口腔医学研究杂志(电子版), 2022, 16(02): 100-105.
[7]	姚小武, 林敏校, 陈仕生, 卢子正. 幽门螺杆菌感染与口腔扁平苔藓和鳞状细胞癌相关性的初步探讨[J/OL]. 中华口腔医学研究杂志(电子版), 2014, 8(05): 364-369.
[8]	谢舒乐, 杨宏宇. TGF-β 信号通路与口腔鳞状细胞癌的研究进展[J/OL]. 中华口腔医学研究杂志(电子版), 2014, 8(03): 256-260.
[9]	冯炼, 洪筠, 杨灵澜, 戴耀晖. 他克莫司与地塞米松治疗口腔扁平苔藓的短期疗效对比[J/OL]. 中华口腔医学研究杂志(电子版), 2014, 8(01): 59-62.
[10]	洪筠, 李婕, 杨灵澜, 陈小冰, 程斌, 陈小华. 颊细胞微核试验评价口腔扁平苔藓恶变风险及其药物治疗效果[J/OL]. 中华口腔医学研究杂志(电子版), 2012, 6(05): 431-435.
[11]	杜锐, 陈小冰, 吴桐, 程斌. 白细胞介素1β 增强口腔鳞状细胞癌细胞体外侵袭能力及其机制研究[J/OL]. 中华口腔医学研究杂志(电子版), 2012, 6(03): 239-244.
[12]	曾旖, 张从纪, 叶艳艳, 郭俊峰, 杨军, 熊宇. 口腔鳞状细胞癌患者外周血Naa10及淋巴细胞免疫分型的特点及临床意义[J/OL]. 中华细胞与干细胞杂志(电子版), 2019, 09(04): 193-198.
[13]	朱江, 董伟杰, 黄丹, 宋冬惠, 吴森斌. 口腔鳞状细胞癌组织中lncRNA DLEU1的表达及其与临床病理参数和预后的关系[J/OL]. 中华临床医师杂志(电子版), 2022, 16(02): 131-135.
[14]	葛蓓蓓, 宋勇. 硫酸羟氯喹联合白芍总苷肽治疗口腔糜烂型扁平苔藓的临床应用[J/OL]. 中华临床医师杂志(电子版), 2021, 15(01): 32-36.
[15]	梁铮, 利嘉琦, 吕玉华, 蔡志梁, 晁艳, 周厚全, 卢燕君. 枸杞多糖对大鼠角膜缘干细胞体外增殖的影响研究[J/OL]. 中华临床实验室管理电子杂志, 2020, 08(04): 246-250.

阅读次数

全文

摘要

选择文件类型/文献管理软件名称

选择包含的内容

Expression of p63 in oral lichen planus

模态框（Modal）标题

选择文件类型/文献管理软件名称

选择包含的内容

Expression of p63 in oral lichen planus