不同电动牙刷对邻面菌斑生物膜的影响

doi:10.3877/cma.j.issn.1674-1366.2018.02.004

目的

研究体外模型中不同运动模式和不同频率的电动牙刷对邻面菌斑生物膜的影响。

方法

培养变异链球菌（S.mutans）、血链球菌（S.sanguis）和内氏放线菌（A.naeslundii）形成三菌种生物膜。实验分为4组，其中3组分别用高频率声波型电动牙刷、振动旋转型电动牙刷和低频率声波型电动牙刷在体外模型中对邻面生物膜进行非接触去除，另1组为对照组，不处理。结晶紫吸附实验半定量计算各组邻面生物膜去除量，激光共聚焦扫描显微镜观察菌斑生物膜，Comstat 2.1软件测量生物膜的总生物量、平均厚度、平均扩散距离。单因素方差分析及LSD-t检验对数据统计分析。

结果

结晶紫吸附实验结果显示，高频率声波型组的生物膜去除量（0.40 ± 0.08）大于振动旋转型组的生物膜去除量（0.24 ± 0.09），差异有统计学意义（t= 4.289，P<0.001），同时也大于低频率声波型组的生物膜去除量（0.24 ± 0.05），差异有统计学意义（t= 4.407，P<0.001）。高频率声波型电动牙刷组的生物膜总生物量[（7.54 ± 1.35）μm³/μm²]小于振动旋转型电动牙刷组[（11.86 ± 1.56）μm³/μm²]和低频率声波型电动牙刷组[（11.84 ± 1.42）μm³/μm²]，差异有统计学意义（t_{振动旋转型组}=3.373，P_{振动旋转型组}=0.005；t_{低频率声波型组}= 3.215，P_{低频率声波型组}= 0.007）。高频率声波型电动牙刷组的生物膜平均扩散距离[（0.23 ± 0.02）μm]小于振动旋转型电动牙刷组[（0.76 ± 0.10）μm]和低频率声波型电动牙刷组[（0.71 ± 0.13）μm]，差异有统计学意义（t_{振动旋转型组}=2.852，P_{振动旋转型组}= 0.014；t_{低频率声波型组}=2.470，P_{低频率声波型组}= 0.028）。

结论

在体外模型中，相比振动旋转型电动牙刷和低频率声波型电动牙刷，高频率声波型电动牙刷可更高效去除邻面菌斑生物膜，降低生物膜密度。

关键词: 刷牙, 体外, 牙模型, 邻面生物膜, 非接触去除

Objective

To investigate the effect of various power toothbrushes with different action mode and frequency on interproximal biofilm in an in vitro model.

Methods

Streptococcus mutans, Streptococcus sanguis and Actinomyces naeslundii were cultivated to form a three-species biofilm. The tests were divided into four groups, all of which were conducted with non-contact removal by high frequency sonic (HFS) power toothbrush, oscillating-rotating (O-R) power toothbrush and low frequency sonic (LFS) power toothbrush groups and a control group without any treatment in an in vitro model respectively. Interproximal biofilm removal was semi-quantitative calculated by crystal violet staining method. Interproximal biofilm was observed by confocal laser scanning microscope. Biomass, average thickness and average diffusion distance (ADD) were measured by Comstat 2.1 software. Data were analyzed by One-Way ANOVA and LSD-t test.

Results

The result of crystal violet staining method showed that, the biofilm removal of HFS group (0.40 ± 0.08) was greater than the biofilm removal of O-R group (0.24 ± 0.09) , and the difference was statistically significant (t= 4.289, P<0.001) . Moreover, the HFS group also had a greater biofilm removal efficiency than that of LFS group (0.24 ± 0.05) with statistically significant difference (t= 4.407, P<0.001) . Confocal laser scanning microscopy 3D reconstruction images were analyzed by Comstat 2.1 software. Results indicated that the biomass of HFS group (7.54 ± 1.35) μm³/μm² was less than O-R group (11.86 ± 1.56) μm³/μm² and LFS group (11.84 ± 1.42) μm³/μm², and the differences were statistically significant (t_{O-R group}= 3.373, P_{O-R group}= 0.005; t_{LFS group}= 3.215, P_{LFS group}= 0.007) . The ADD of HFS group (0.23 ± 0.02) μm was less than O-R group (0.76 ± 0.10) μm and LFS group (0.71 ± 0.13) μm with statistically significant differences (t_{O-R group}= 2.852, P_{O-R group}= 0.014; t_{LFS group}= 2.470, P_{LFS group}= 0.028) .

Conclusions

In an in vitro model, compared with oscillating-rotating toothbrush and low frequency sonic toothbrush, high frequency sonic power toothbrush could be more effective in removing interproximal biofilm and decreasing biofilm density.

Key words: Toothbrushing, In vitro, Dental models, Biofilms, interproximal, Non-contact removal

图1 实验用电动牙刷（从左到右：Gevilan、Oral-B、Sonicare）

图2 邻面模型中电动牙刷和生物膜的位置关系模拟图

图3 结晶紫染色法比较各处理组生物膜去除量（^aP<0.001）

图4 生物膜激光共聚焦三维重建图（荧光染色中倍放大）

图5 生物膜总生物量Comstat分析结果（^aP<0.001，^bP<0.05）

图6 生物膜平均厚度Comstat分析结果（^aP<0.05）

图7 生物膜平均扩散距离Comstat分析结果（^aP<0.05，^bP<0.01）

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