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中华口腔医学研究杂志(电子版) ›› 2014, Vol. 8 ›› Issue (02) : 118 -122. doi: 10.3877/cma.j.issn.1674-1366.2014.02.006

基础研究

MTUS1/ATIP1 对舌鳞癌细胞增殖及凋亡的影响
张宁宁1, 赵婷婷1, 何倩婷1, 丁学强1, 刘中华1, 王安训1,()   
  1. 1.510080 广州,中山大学附属第一医院口腔颌面外科
  • 收稿日期:2013-05-26 出版日期:2014-04-01
  • 通信作者: 王安训
  • 基金资助:
    国家自然科学基金(81272953、81072228)高校基本科研业务费“中山大学青年教师重点培育计划”(11ykzd09)2009年度新世纪优秀人才支持计划(NCET-10-0857)广东省自然科学基金(10151008901000093)

The effect of MTUS1/ATIP1 on proliferation and apopsis of oral tongue squmous cell carcinoma

Ningning Zhang1, Tingting Zhao1, Qianting He1, Xueqiang Ding1, Zhonghua Liu1, Anxun Wang1,()   

  1. 1.Department of Oral and Maxillofacial Surgery, The First Affiliated Hospital, Sun Yat-sen University,Guangzhou 510080, China
  • Received:2013-05-26 Published:2014-04-01
  • Corresponding author: Anxun Wang
引用本文:

张宁宁, 赵婷婷, 何倩婷, 丁学强, 刘中华, 王安训. MTUS1/ATIP1 对舌鳞癌细胞增殖及凋亡的影响[J/OL]. 中华口腔医学研究杂志(电子版), 2014, 8(02): 118-122.

Ningning Zhang, Tingting Zhao, Qianting He, Xueqiang Ding, Zhonghua Liu, Anxun Wang. The effect of MTUS1/ATIP1 on proliferation and apopsis of oral tongue squmous cell carcinoma[J/OL]. Chinese Journal of Stomatological Research(Electronic Edition), 2014, 8(02): 118-122.

目的

探讨过表达MTUS1/ATIP1 对舌鳞癌细胞增殖及凋亡的影响。

方法

检测人舌鳞癌系UM1、SCC-9、SCC-15、Tca8113 细胞株中MTUS1 的表达水平。 应用含ATIP1 片段的质粒转染舌鳞癌细胞,48 h 后MTT 检测舌鳞癌细胞的增殖能力;应用流式细胞仪技术和细胞免疫荧光技术检测细胞周期和细胞凋亡率;Western blot 检测舌鳞癌细胞中MTUS1、p53、ERK1/2 的表达情况。

结果

转染MTUS1/ATIP1 后细胞的增殖明显受到抑制,其抑制率约为40%(t=0.023,P<0.05);高表达MTUS1/ATIP1 可导致舌鳞癌细胞株G1 期阻滞(G1 期:t=0.032,G2 期:t=0.036,S 期:t=0.027,P<0.05)并诱导细胞凋亡率的明显升高,差异具有统计学意义(t=0.005,P<0.05)。 Western blot 检测显示,转染MTUS1/ATIP1 后ERK 的表达升高,磷酸化的ERK 表达下降,p53 的表达升高。

结论

MTUS1 可抑制舌鳞癌细胞的增殖,诱导细胞凋亡。

Objective

To investigate the role of MTUS1/ATIP1 in suppression proliferation and induce apoptosis of oral tongue squmous cell carcinoma.

Methods

Investigate the expression levels of MTUS1 in human tongue cell carcinoma cell lines (UM1, SCC-15, SCC-9, Tca8113). Tongue squamous cancer cell were transfected with a ATIP1 expression vector for 48 h. The Proliferation analysis was performed with MTT assay. Flow cytometry and immunofluorescence technique were employed to measure cell cycle and apoptosis of tongue cell carcinoma cells. The expression levels of proteins, MTUS1, p53,ERK1/2, in tongue cell carcinoma cells transfected with ATIP1 were detected by Western blotting.

Results

In vitro functional study showed that over-expression of MTUS1/ATIP1 significantly increased the apoptosis rate (P<0.05), led to G1 arrest and decreased the proliferation activity, with an inhibition rate of about 40% (P<0.05) in OTSCC cell lines. The over-expression of MTUS1/ATIP1 induced the reduction of phosphor-ylation of ERK and up-regulation of p53 and ERK.

Conclusion

MTUS1/ATIP1 is suppose to be associated with inhibit proliferation and induce apoptosis in oral tongue squmous cell carcinoma.

图1 pEGFP-N3-MTUS1 载体双切后产物琼脂糖凝胶电泳结果 注:M1 为DL2000 DNA Marker;1~4 分别为pEGFP-N3-MTUS1质粒与酶切后产物;M2 为1000 bp DNA Ladder Marker;黄色箭头指示双酶切后目的条带1318 bp MTUS1/ATIP1,红色箭头指示为4700 bp pEGFP-N3
图2 转染MTUS1/ATIP1 后舌鳞癌细胞增殖的影响(P<0.05)
图3 UM1 转染MTUS1 后细胞凋亡的影响(P<0.05)
图4 UM1 转染MTUS1 后细胞周期的影响(P<0.05)
图5 舌鳞癌细胞转染MTUS1 后细胞蛋白表达的影响 注:图5A 为与正常舌黏膜细胞相比,舌鳞癌细胞株中MTUS1的表达明显下降;图5B~图5C 为UM1、Tca8113 转染MTUS1/ATIP1 后MTUS1 的表达明显升高;图5D 为当MTUS1/ATIP1高表达时,UM1 细胞中ERK 含量明显增加,pERK 显著下降;图5E 为与转染空白质粒比较,SCC-9 转染含ATIP1 的质粒后p53 的表达显著升高(P<0.05)
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